点击蓝字 隐丹参酮是一种二萜醌类化合物，是丹参的重要功效成分，能有效抑制小鼠胚胎成纤维细胞、人肺成纤维细胞肺纤维化相关蛋白表达及TGF-β诱导的EMT。这些研究为丹参在抑制肺纤维化中的应用提供了一定参考［20］。2.1.3 其他 川芎嗪具有防治肾间质纤维化的作用，能有效减轻UUO诱导的大鼠肾间质纤维化,其作用机制与其抑制分化抑制因子1及小窝蛋白1表达,逆转EMT有关［21］。川芎嗪可通过抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞中p-Smad2、α-SMA及Smad转录共抑制因子SnoN的蛋白表达，阻断HK-2细胞的EMT［22］。盐酸川芎嗪可显著抑制小鼠肺癌细胞的生长、侵袭和黏附,其机制可能与促进E-钙黏素表达有关［23］。潘晶等［24］探讨了三七皂苷(panaxnotoginsengsaponins,PNS)对TGF-β1诱导的大鼠肾小管细胞EMT的干预作用与可能机制，结果发现，PNS可增加大鼠肾小管上皮细胞E-钙黏素表达,降低α-SMA表达,同时增加沉默信息调节因子2相关酶1(silentinformationregulator1,SIRT1)表达,降低TGF-β1、Smad3、Smad4表达，这些作用能被SIRT1阻断剂EX阻断，提示PNS可以阻止TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞EMT的发生。PNS通过提高上皮标志物E-钙黏素并抑制间质标志物、波形蛋白的表达,对TGF-β1诱导肺腺癌A细胞EMT有一定的干预作用［25］。牡丹皮提取物(丹皮酚、总苷和多糖提取物按照一定比例形成的组合物)能显著抑制TGF-β1诱导的MRC-5细胞中E-钙黏素表达的下调及纤维连接蛋白与胶原蛋白Ⅰ表达的上调，提示牡丹皮提取物可能具有抑制肺纤维化形成和发展的作用［26］。近来研究表明，桃红芪术软肝煎用药后大鼠肝细胞TGF-β1、波形蛋白mRNA、Smad2mRNA表达量明显下降，提示桃红芪术软肝煎通过抑制TGF-β/Smad信号通路，调节EMT,有抗大鼠肝纤维化的作用［27］。2.2 益气养阴类2.2.1 黄芪 黄芪为重要的补气药,全身之气皆能补益,具有补脾健胃、补肺益气、补气固气等功效，古人把黄芪推崇为“补气诸药之最”。黄芪主要药理成分为黄芪皂苷、黄芪多糖、氨基丁酸以及多种微量元素，临床可用于治疗心脏疾病、消化系统疾病、血液肿瘤、泌尿系统疾病等。研究发现，黄芪注射液能抑制肺泡上皮细胞EMT,下调TNF-α和TGF-β1表达,改善博来霉素诱导的小鼠肺纤维化病理改变［28］。徐昌君等［29］通过研究黄芪甲苷对特发性肺纤维化自噬活性及PI3K/AKT/雷帕霉素靶蛋白（mammaliantargetofrapamycin,mTOR）信号的调控作用，进一步探讨黄芪的抗肺纤维化机制，结果表明，黄芪甲苷能抑制肺组织炎症反应,下调肺组织细胞中TGF-β1和胶原蛋白的表达,提高自噬相关蛋白微管结合蛋白1轻链3Ⅱ/Ⅰ和Beclin-1表达,减少p62积累,同时抑制PI3K/AKT/mTOR磷酸化水平,减少ɑ-SMA而提高E-钙黏素表达。其结果提示，黄芪甲苷通过抑制肺组织炎性反应，增强肺组织细胞自噬活性,阻止EMT过程，达到抗肺纤维化效果。黄芪注射液也能抑制TGF-β1诱导HK-2细胞表型的改变，减少α-SMA的表达，增加E-钙黏素的表达，阻断或逆转HK-2细胞EMT进程［30-31］。此外，黄芪可抑制UUO大鼠肾组织中α-SMA上调和E-钙黏素下调，减少TGF-β1诱导的Smad2/3磷酸化，抑制EMT的诱导和细胞外基质的沉积，从而起到抗肾纤维化作用［32］。有研究发现，黄芪多糖可降低四氯化碳诱导肝纤维化大鼠肝组织中TGF-β1、Smad3、Smad4的表达，升高Smad7的表达，表明通过调节TGF-β1/Smads信号通路，黄芪多糖对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化有显著的干预作用［33］。中药复方黄芪汤也能显著抑制二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化，这种功效主要与其调节Notch诱导的EMT信号通路相关［34］。这些研究表明黄芪具有抗肺、肾、肝等器官纤维化作用。2.2.2 冬虫夏草 冬虫夏草含有多糖、氨基酸、核苷、脂肪酸等成分,具有抗肿瘤、调节免疫功能、促进细胞修复、抗自由基、抗氧化等功能。冬虫夏草人工繁育品是人工培养发酵产品，能抑制TGF-β1诱导肺泡组织中Smad3的表达［35］，上调Smad7表达［36］，而后者是抑制TGF-β1诱导的信号通路活化的重要因子，它可通过多种途径抑制TGF-β1诱导的EMT反应，对多个脏器的纤维化进程产生抑制作用。结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)是TGF-β1-Smad通路的下游效应分子，通过其富含半胱氨酸结构域与TGF-β1结合，介导TGF-β1的促纤维化效应［37］。冬虫夏草与糖皮质激素的联合应用能起到抗大鼠肺纤维化的作用，虫草菌液与泼尼松单一应用均能明显下调CTGF在肺泡上皮细胞、成纤维细胞、巨噬细胞中表达，二药联合应用下调CTGF作用更明显，并能减少CTGF与TGF-β1的结合，这可能是二药合用作用增强的原因［38］。2.2.3 参类 人参含有人参皂苷、多糖、挥发油和氨基酸等多种成分,具有抗疲劳、抗衰老、抗氧化和提高免疫力等作用。人参皂苷是一种糖苷类成分，研究表明，人参皂苷Rg1可能通过调控NF-κB抑制缺氧诱导人卵巢癌细胞（SKOV3）的EMT［39］。人参皂苷Rg3能提高人肝癌细胞HepG2/EMT细胞对索拉非尼的敏感性,可能与调节Ras/MEK/ERK信号通路有关［40］。北沙参为伞形科植物珊瑚菜的干燥根，具有养阴清肺养胃生津的功效。北沙参外皮经乙醇提取、石油醚萃取得到北沙参石油醚，后者对肺纤维化和肺炎有防治作用，并有抗衰老及抗肿瘤等药理学作用。李雅群等［41］研究发现，北沙参石油醚能有效抑制TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞EMT,表现为胶原蛋白Ⅰ、波形蛋白、α-SMA表达下调,E-钙黏素表达增加，是特发性肺纤维化的潜在治疗药物。党参主要成分有多糖、党参苷、甾醇类等，具有补中益气、健脾益肺、抗氧化、抗癌和增强免疫活性等功效。现代药理研究表明，党参乙酸乙酯提取物对TGF-β1诱导的肺癌Ⅱ型上皮细胞A有抑制作用［42］。2.2.4 地黄 地黄是环烯醚萜类苷、低聚糖和多糖提取物按照一定比例形成的组合物，能有效抑制人肺泡上皮细胞AEMT,作用机制涉及对TGF-β1信号转导通路及基质金属蛋白酶-9降解细胞外基质作用的抑制［43］。2.2.5 益气养阴类复方 金匮肾气丸由炮附子、熟地黄、山茱萸、泽泻、肉桂、丹皮、山药、茯苓8味药组成，主要用于治疗因肾阳不足所致的咳嗽、哮喘、阳痿、早泄、慢性肾炎等疾病。TGF-β1刺激后,肾小管上皮细胞由铺路石样变成长梭形状,E-钙黏素表达下调,波形蛋白表达显著上升，给予金匮肾气丸含药血清干预后,可抑制上述改变，并显著下调磷酸化Smad2/3、ILK/磷酸化糖原合酶激酶3β和β-连环蛋白的表达。因此，金匮肾气丸能抑制肾小管上皮细胞EMT,其作用机制可能与其抑制TGF-β/Smads/ILK信号通路的激活有关［44］。参七虫草胶囊通过调节肺组织中E-钙黏素、α-SMA和波形蛋白表达水平，从而抑制EMT的发生，改善博莱霉素致肺纤维化大鼠肺泡上皮细胞间质的转化［45］。2.3 清热散结类2.3.1 苦杏仁苷 苦杏仁是传统的清热散结类中药，其有效成分主要为苦杏仁苷。方克勇等［46］报道了苦杏仁苷在体外可以抑制由香烟烟雾刺激引起的人支气管上皮细胞株EMT,这种作用与其抑制TGF-β/Smad通路有关；而动物实验表明，苦杏仁苷治疗组小鼠肺功能增加,炎症细胞浸润减少,气道上皮E-钙黏素表达上升、平滑肌肌层变薄,波形蛋白、TGF-β1、磷酸化Smad2及磷酸化Smad3的表达显著下降。这表明一方面苦杏仁苷可以减轻慢性阻塞性肺疾病小鼠肺部炎症,另一方面可以抑制肺组织气道内的EMT过程。2.3.2 阿魏酸 阿魏酸是植物界普遍存在的一种酚酸，是阿魏、川芎、当归、升麻等多种中药的有效成分之一。具有抗氧化、清除自由基、保护细胞、抗突变与抗癌等作用。WEI等［47］研究了阿魏酸对TGF-β1诱导的肾近端小管上皮细胞系（NRK-52E）细胞EMT模型的影响，结果发现，阿魏酸处理后肾小管上皮细胞E-钙黏素表达增多，α-SMA、磷酸化Smad2/3、ILK和蜗牛蛋白（Snail）表达减少，提示阿魏酸或可通过调控Smad/ILK/Snail信号通路抑制EMT［47］。2.3.3 苦参 中药苦参具有清热燥湿、杀虫、利尿等功效。其主要成分苦参素是一类含有苦参次碱15酮基本结构的化合物，具有抗炎、抗肝纤维化、抗肿瘤等药理作用。李立［48］研究发现，苦参素可能通过抑制TGF-β1受体,进而抑制TGF-β1诱导HK-2细胞E-钙黏素的丢失,并下调其纤维连接蛋白和α-SMA蛋白的表达,阻断HK-2细胞的EMT,从而起到抗肾间质纤维化的作用。2.3.4 清热散结类复方 天龙咳喘灵是清热散结类复方，主要由青天葵、法半夏、款冬花、熟附子、鱼腥草、五味子等多味药材组成,具有抗感染、化痰止咳平喘、提高机体免疫力的功效。近来研究表明，天龙咳喘灵提取物能抑制TGF-β1诱导的人肺腺癌A细胞EMT，表现为上皮细胞形态恢复,E-钙黏素表达上调,纤维连接蛋白表达下调；Notch信号分子Notch1、Jagged1、Hey1的表达下调，敲除Jagged1基因后,TGF-β1诱导的E-钙黏素表达下调和纤维连接蛋白表达上调受到抑制，提示天龙咳喘灵提取物通过下调Notch信号通路抑制TGF-β1诱导的EMT［49］。2.3.5 其他 黄芩素可逆转人肺腺癌耐顺铂细胞株的EMT，可显著降低人肺腺癌耐顺铂细胞的侵袭、迁移能力，上调E-钙黏素的表达,降低波形蛋白的表达水平，逆转该细胞EMT。黄芩素这种作用与其阻断细胞内的PI3K/AKT/NF-κB信号通路，抑制抗凋亡基因的表达有关［50］。黄芩素进入体内后，转化为黄芩苷等代谢物，能降低UUO大鼠肾纤维化模型肾组织中TGF-β1水平，抑制Smad2/3磷酸化，降低纤维连接蛋白、胶原蛋白Ⅰ、α-SMA和波形蛋白的表达，上调N-钙黏素和E-钙黏素表达水平，因此，黄芩素能抑制EMT并显著改善肾纤维化［51］。柴胡皂苷D抑制Wnt/β-连环蛋白信号传导通路负向调节EMT，对肺纤维化有一定治疗价值［53］。同为发散风热药的牛蒡子苷能通过下调TGF-β1及其受体的表达、抑制Smad2/3磷酸化、核移位并上调Smad7的表达，从而抑制UUO诱导的大鼠肾纤维化［54］。橙皮苷能够降低α-SMA、基质金属蛋白酶-9水平和基质金属蛋白酶-9/组织金属蛋白酶抑制剂-1比值,增加E-钙黏素水平,表明橙皮苷能减轻TGF-β1诱导的非小细胞肺癌细胞的EMT程度,对非小细胞肺癌的转移和扩散有一定的抑制作用［55］。3展望EMT参与了许多疾病的产生和发展，在多种器官纤维化的产生、演变过程中的作用受到了越来越多的
